“Potencial Terapêutico da Bactéria Zymomonas mobilis: Otimização da Produção Heteróloga de Anti-CD3 e eGFP Pelo Sistema Biológico do Repressor Reverso de Tetraciclina.”
Zymomonas mobilis; repressor reverso de tetraciclina; anti-CD3; surface display; doenças inflamatórias intestinais; produção heteróloga; probiótico.
As doenças inflamatórias intestinais (DII) representam um problema de saúde pública de relevância crescente, com opções terapêuticas ainda limitadas por efeitos adversos sistêmicos, perda de eficácia e elevado custo. Nesse contexto, a utilização de microrganismos probióticos geneticamente modificados como plataformas de entrega localizada de biofármacos imunomoduladores na mucosa intestinal emerge como uma alternativa promissora. A bactéria Zymomonas mobilis, com status GRAS e comprovado potencial probiótico e imunomodulador, representa uma plataforma de interesse singular para essa abordagem. No entanto, a produção heteróloga de anticorpos em Z. mobilis utilizando promotores constitutivos resultou previamente na formação de corpos de inclusão e comprometimento do crescimento celular. O presente trabalho desenvolveu e caracterizou um sistema de expressão regulada baseado no repressor reverso de tetraciclina (revTetR), associado à tecnologia de surface display, para a produção controlada do anticorpo anti-CD3 scFv ancorado na superfície celular de Z. mobilis. Os vetores construídos demonstraram estabilidade genética após cinco ciclos de repicagem sem pressão seletiva e a expressão heteróloga não comprometeu o crescimento das linhagens recombinantes. O sistema revelou-se funcional e regulável de forma dose-dependente à concentração de tetraciclina, sem diferença significativa entre tetraciclina e anidrotetraciclina nas condições testadas. A expressão do anticorpo anti-CD3 na superfície celular foi confirmada por western blot e citometria de fluxo para ambas as proteínas de ancoragem avaliadas, InaK e EstP, sendo InaK superior nos níveis de exibição superficial do anticorpo. Em conjunto, os resultados demonstram que Z. mobilis é capaz de exibir o anticorpo anti-CD3 em sua superfície celular de forma controlada pelo sistema revTetR, constituindo uma plataforma bioterapêutica promissora para o tratamento das doenças inflamatórias intestinais.