“Avaliação da ativação do sistema imunológico através de azul de metileno associado a nanoestruturas para câncer de mama e de ovário in vitro”
Câncer de Mama; Câncer de Ovário; Nanobiotecnologia, Sistema Imunológico, EROs.
O câncer de mama, segundo tipo mais comum, e o câncer de ovário, aquele que apresenta a maior letalidade quando comparado aos outros tipos de câncer do aparelho genital feminino, são os que mais se destacam em mulheres. O papel do sistema imunológico no tratamento do câncer tem promovido o desenvolvimento de inúmeros trabalhos na área das imunoterapias abrangendo, também, a nanobiotecnologia, que vem ganhando destaque pelo diagnóstico precoce, liberação controlada e direcionada de fármacos, além de ser capaz de promover uma resposta imune baseada na ativação de células dendríticas voltadas para o tratamento do câncer. Estudos anteriores demonstram a eficácia, in vitro, do uso de nanopartículas de maghemita associadas ao azul de metileno (MAGCIT-AM) para o tratamento de câncer de mama e de ovário. Assim, o presente trabalho incluiu a aplicação do MAGCIT-AM para promover resposta imune antitumoral para o tratamento do câncer de mama e de ovário in vitro. Neste trabalho foram utilizadas duas linhagens celulares de carcinoma de mama humano e uma linhagem de câncer de ovário. MAGCIT- AM apresentou diâmetro hidrodinâmico de 60,93 nm com índice de polidispersão de 0,199 e potencial zeta de -20,9 mV. A endocitose das nanopartículas ocorre após 6 horas de tratamento, é possível observar uma grande quantidade de nanopartículas internalizadas movendo-se para o interior das células em estruturas bem delimitadas, semelhantes a lisossomos e/ou endossomos, como mostram as análises de microscopia eletrônica de transmissão (MET). O ensaio de Wound Healing demonstrou uma inibição da migração de células tumorais, incluindo a MDA-MB-231, linhagem que não se observou redução da viabilidade celular. Panótipo rápido com microscopia de luz, indicam a internalização de nanopartículas e alterações morfológicas após tratamento. Pode-se observar, por citometria de fluxo, uma modulação na biogênese de corpúsculo lipídico e uma redução do potencial transmembranar mitocondrial após o tratamento com MAGCIT-AM. A maturação das células dendríticas foi analisada após serem incubadas com o sobrenadante de células tumorais previamente tratadas, observa-se por citometria de fluxo que, após a estimulação, as células dendríticas exibiram alterações na expressão de CD80, CD86 e CD11c, além de alterações em sua morfologia celular, adquirindo uma forma fusiforme e aderente com extensões citoplasmáticas, o qual pode ser observada em microscopia de luz.