Banca de DEFESA: Igor Patrick Vasconcelos Vieira

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Igor Patrick Vasconcelos Vieira
DATA : 16/05/2024
HORA: 10:00
LOCAL: Online
TÍTULO:

 Desenvolvimento de linhagens de Komagataella phaffii contendo novos sistema de controle da expressão gênica e proteica livres de metanol 

PALAVRAS-CHAVES:

Komagataella phaffii; riboswitch; tetraciclina; aptâmero; controle de expressão gênica;

PÁGINAS: 88
RESUMO:

Komagataella phaffi (anteriormente conhecida como Pichia pastoris) é uma levedura considerada como uma das mais importantes plataformas disponíveis para produção de proteínas e metabólitos em larga escala da atualidade, devida a sua alta produtividade e fácil controle dos parâmetros fermentativos. Sua característica fisiológica mais distinta é a capacidade de usar metanol como fonte única de carbono graças à hiperexpressão do gene AOX1 que codifica para a enzima peroxissomal álcool oxidase. O promotor PAOX1 permite a alta expressão com controle finamente regulado pela concentração de metanol, o que o tornou o sistema de expressão recombinante mais utilizado neste organismo. No entanto, a maior limitação deste sistema no contexto de bioprocessos industriais é o fato do metanol ser altamente tóxico e inflamável. Faz-se necessário o desenvolvimento de um sistema de indução da expressão gênica baseado em um agente indutor atóxico, preferencialmente não consumido pela célula, a fim de diminuir os custos de produção em larga escala. Neste trabalho foram testados dois mecanismos de controle de expressão: à nível transcricional, pelo sistema GAL proveniente de S. cerevisiae buscando a indução da produção da proteína recombinante fluorescente verde (GFP) sob controle do promotor PGAL1 regulado por galactose e; o sistema de controle de expressão a nível traducional utilizando um riboswitch controlado por tetraciclina buscando inibir a produção das proteínas β-galactosidase e Ku70p. Os resultados demonstraram sucesso na utilização do riboswitch como mecanismo de controle da produção de proteína em K. phaffi com fácil aplicação e potencial grande impacto na aplicação deste sistema em larga escala. 

MEMBROS DA BANCA:
Externa ao Programa - 2518326 - CINTIA MARQUES COELHO - nullPresidente - 1193623 - FERNANDO ARARIPE GONCALVES TORRES
Externo à Instituição - JOÃO RICARDO MOREIRA DE ALMEIDA - EMBRAPA
Externa ao Programa - 2221665 - LIDIA MARIA PEPE DE MORAES - nullExterna à Instituição - Milca Rachel da Costa Ribeiro Lins - UFABC