Banca de DEFESA: Nayara Ribeiro Kussano

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Nayara Ribeiro Kussano
DATA : 16/12/2022
HORA: 14:00
LOCAL: Auditório do Instituto de Ciências Biológicas
TÍTULO:

MARCADORES BIOQUÍMICOS PARA A COMPETÊNCIA OVOCITÁRIA EM BOVINOS

PALAVRAS-CHAVES:

marcadores, líquido folicular, embrião, células foliculares

PÁGINAS: 135
RESUMO:

Este estudo teve como objetivo avaliar características bioquímicas do ambiente folicular na capacidade do ovócito de formar embrião e identificar marcadores para selecionar ovócitos mais competentes. Inicialmente foi avaliado se a fonte proteica (FP) utilizada durante a maturação in vitro (MIV) afetariam o sexo / desenvolvimento do embrião e o perfil de expressão de genes candidatos nas CC. Ovócitos bovinosforam maturados e cultivados na presença de soro fetal bovino (SFB) ou albumina sérica bovina (BSA), biopsias de CC foram removidas antes e após a MIV, e após a fecundação e o cultivo, as CCsforam agrupadas de acordo com seu resultado em: CCs de CCOs imaturos e CCs de CCOs maturados que resultaram ou não em embriões. O efeito da FP durante a MIV foi determinado pela quantificação de transcritos dos genes, GPC4, VCAN, GHR, PTGS2 e ALCAM. Os resultados mostraram que a FP afeta a produção de embriões se o SFB for usado tanto na MIV quanto no CIV. No entanto, quando o embrião é cultivado em BSA, a FP durante a MIV não tem nenhum efeito. Além disso, a FP durante a MIV afeta a expressão dos genes VCAN, GHR, PTGS2 e ALCAM nas CCs, e apenas o gene GHR foi expresso de forma diferente (P <0,05) em CC imaturas do grupo que deu embrião, mas apenas quando SFB foi usado na MIV. Na segunda parte do estudo características bioquímicas do ambiente folicular que contêm ovócitos capazes ou não de formar embrião. Folículos de 5-6mm foram dissecados e de cada folículo foram coletados individualmente amostras de líquido folicular (LF), células da granulosa (CG), CC imaturas e maturadas, e os CCOs foram utilizados para a produção de embriões. No D8 de acordo com o resultado as amostras foram agrupadas em: as que os ovócitos originaram embrião (EMB) e as que não originaram (NEMB). Nas CC imaturas e maturas e CGs foi analisada por qPCR a expressão de 8 genes: CASP3, SERPINE2, VCAN, LUM, FSHR, EGFR, PGR e GHR. E no LF foi avaliado DNA livre de células (cfDNA), por quantificação das sequencias de ART2 e BOVTA por qPCR e a concentração de progesterona e estradiol por quimiluminescência e eletroquimioluminescência, respectivamente. Dos 8 genes avaliados, o gene GHR apresentou maior quantidade de transcritos em CC imaturas de CCOs do grupo EMB, CASP3 apresentou maior expressão em CC maturas do grupo NEMB, e os genes CASP3 e GHR apresentaram aumento no nível de transcritos durante a MIV apenas no grupo NEMB, já o gene VCAN apresentou aumento durante a MIV nas CC do grupo EMB. As análises das amostras de LF, mostraram maior quantidade (P<0.05) de cfDNA somente do gene ART2 no LF do grupo NEMB comparado ao EMB. A concentração de progesterona no LF foi similar entre os grupos, enquanto a de estradiol foi maior (P<0,05) no grupo EMB, consequentemente maior relação P4/E2 foi encontrada no grupo EMB (P<0,05). Conclui-se que, que a FP durante a MIV pode afetar a expressão de genes candidatos. E, que maior nível de transcritos de GHR em CC imaturas, a menor expressão de CASP3 em CC maturas, a alto nível do gene ART2, a concentração de Estradiol e a relação de P4/E2 no LF podem indicar ovócitos com maior potencial de desenvolvimento.

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 2374060 - CAROLINA MADEIRA LUCCI
Externo ao Programa - 1806685 - IVO PIVATO
Externo à Instituição - JOSE FELIPE WARMLING SPRICIGO - UFG
Presidente - 395.928.980-49 - MARGOT ALVES NUNES DODE - EMBRAPA
Externo à Instituição - MAURÍCIO MACHAIM FRANCO - EMBRAPA