"Edição genômica utilizando a ferramenta CRISPR/Cas9 em células e embriões para inserção de genes de interesse no locus H11 no genoma bovino."
Transgenia; Biotecnologia; Biologia Animal; Genética Molecular; Edição Genômica
O Brasil possui o maior rebanho comercial bovino do mundo com mais de 210 milhões de cabeças de gado, além de ser atualmente o maior exportador de carne bovina. Com o crescimento dessa atividade econômica também é crescente a demanda para o emprego de tecnologias avançadas, entre elas a produção de animais geneticamente modificados (AGM) que venham a abordar problemas desde aumento da produtividade até sanidade animal. Com esse projeto, intencionamos investigar o uso do sistema CRISPR/Cas9 como modelo para estabelecimento de uma metodologia de edição genômica visando a inserção (knockin) direta de genes de interesse biotecnológico, agropecuário, ou industrial no locus H11 do genoma bovino (Bos taurus). Esse estudo analisará em células bovinas a capacidade do sistema CRISPR/Cas9 em inserir cassetes de expressão de um gene repórter (eGFP) em um sítio específico e seguro do genoma, denominado locus H11. Em uma segunda fase, as melhores condições do funcionamento do sistema CRISPR/Cas9 avaliados nas células serão empregado para a microinjeção e/ou eletroporação do sistema CRISPR/Cas9 diretamente em zigotos bovinos, com o objetivo de editar diretamente o genoma de embriões bovinos, inserindo genes de interesse em um local seguro e predeterminado do genoma dessa espécie de grande importância zootécnica.