Banca de DEFESA: Luiz Silva de Souza

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Luiz Silva de Souza
DATA : 27/08/2026
HORA: 14:00
LOCAL: Auditório 2 - IB
TÍTULO:

Produção e avaliação da ligação celular de anticorpos monoclonais humanos anti-cd20 no formato fvfc

PALAVRAS-CHAVES:

Anticorpos monoclonais humanos; CD20; Expressão heteróloga; Células de Mamíferos; Formato FvFc; Citometria de Fluxo.

PÁGINAS: 134
RESUMO:

O linfoma não-Hodgkin (LNH) demanda o desenvolvimento constante de novas alternativas imunoterapêuticas eficientes. Este trabalho teve como objetivo obter, otimizar o processo de expressão heteróloga e caracterizar a capacidade de ligação de anticorpos monoclonais totalmente humanos e de variantes humanizadas, estruturados no formato recombinante bivalente FvFc e direcionados ao antígeno tumoral CD20. As sequências dos domínios variáveis VH e VL das diferentes variantes engenheiradas foram formatadas na arquitetura FvFc e clonadas em vetores de expressão eucarióticos. O sistema de produção heteróloga em células CHO-K1 foi estabelecido mediante a otimização das etapas de transfecção celular, aplicação de pressão seletiva com antibiótico e isolamento de clones estáveis por diluição limitante. Após a etapa de purificação por cromatografia de afinidade com Proteína A, o perfil eletroforético e a pureza das preparações foram avaliados por eletroforese e imunodetecção. Ensaios funcionais conduzidos por citometria de fluxo demonstraram a ligação dos anticorpos engenheirados a células que expressam o antígeno CD20 em sua conformação nativa de membrana. As variantes humanizadas apresentaram diferentes perfis de intensidade de fluorescência em relação à construção FvFc de referência derivada do Rituximabe, enquanto os clones totalmente humanos Ab1 e Ab7 demonstraram capacidade de ligação às linhagens celulares CD20-positivas avaliadas, sem que os dados permitissem inferir diferenças quantitativas de desempenho entre as construções. Em conclusão, o estudo estabeleceu uma plataforma celular funcional para a obtenção de fragmentos no formato FvFc, indicando a preservação da capacidade de ligação celular dos ligantes e abrindo perspectivas para a avaliação futura de suas atividades citotóxicas efetoras.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1208515 - ANDREA QUEIROZ MARANHAO
Externa à Instituição - Ana Clara Barbosa Antonelli - OUTROS
Externa à Instituição - DANIELA BITTENCOURT - EMBRAPA
Externo à Instituição - RAFAEL TRINDADE BURTET - FACELS
Externa ao Programa - 2255425 - TALITA SOUZA CARMO - null