Banca de QUALIFICAÇÃO: Luiz Silva de Souza

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Luiz Silva de Souza
DATA : 11/12/2024
HORA: 09:30
LOCAL: Auditório Maristella Azevedo, Bloco K, 2o Pavimento
TÍTULO:

"PRODUÇÃO E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE BIOLÓGICA DE ANTICORPOS MONOCLONAIS HUMANOS ANTI-CD20 HUMANO"

PALAVRAS-CHAVES:

Anticorpos monoclonais humanos; CD20; Expressão heteróloga; CHO- K1; FvFc; Tumores.

PÁGINAS: 67
RESUMO:

O linfoma não-Hodgkin (LNH) é uma forma comum de câncer em todo o mundo, representando quase 4,3% de todos os diagnósticos de câncer e mortes. No Brasil, segundo dados do Instituto Nacional do Câncer (INCA) estima-se que em 2 anos mais de 11.000 novos casos de LNH se desenvolvam. Novas metodologias têm sido criadas no intuito de melhorias terapêuticas para o tratamento de tumores como é caso da produção de anticorpos monoclonais (mAbs). Nesse sentido, o presente trabalho tem como objetivo obter e caracterizar anticorpos monoclonais humanos com afinidade ao antígeno CD20 presente em células de alguns linfomas e leucemias. Em trabalhos anteriores do grupo, utilizando a metodologia de Phage Display, foram selecionados sete anticorpos monoclonais humanos específicos ao antígeno do CD20 humano. Neste trabalho, foi padronizado um método de produção heteróloga dos anticorpos em formato de FvFc (constituído pelos domínios variáveis das cadeias leve e pesada conectados por um peptídeo espaçador fusionado ao Fc de IgG 1 humana) em células CHO-K1, utilizando o vetor pCOΔ600. Foram otimizadas as etapas de transfecção, pressão seletiva, seleção clonal e estabelecimento de cultura de produção estável. O protocolo de expressão de maior produtividade testado foi o de duas transfecções consecutivas com uma menor quantidade de Lipofectamina, com pressão seletiva de 800 μg/mL de Geneticina, seguidas de seleção de clones de alta produção por diluição seriada limitante e acúmulo de sobrenadante, na presença de 1,25% de Soro Fetal Bovino (SFB) low-IgG, por 7 dias. Os anticorpos FvFc anti-CD20 produzidos por essa metodologia apresentaram ainda capacidade de ligação ao CD20 expresso na superfície de células tumorais humanas de forma semelhante ao anticorpo terapêutico Rituximabe.

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 2221665 - LIDIA MARIA PEPE DE MORAES
Presidente - 2122537 - MARCELO DE MACEDO BRIGIDO
Externa ao Programa - 2255425 - TALITA SOUZA CARMO - null