“Produção da proteína ECA2 recombinante para utilização no desenvolvimento de
anticorpos monoclonais com fins terapêuticos e diagnósticos da COVID-19”
Transient expression; mammalian cells; recombinant protein; angiotensin-converting
enzyme 2; monoclonal antibodies; COVID-19
O coronavírus SARS-CoV-2, agente etiológico responsável pela pandemia de COVID-
19, reconhece a Enzima Conversora da Angiotensina 2 (ECA2) expressa na membrana
celular como receptor para ligação à célula humana, iniciando assim a infecção viral. As
opções de tratamento existentes até o momento para a doença apresentam várias
limitações e os métodos diagnósticos disponíveis possuem custos, sensibilidades e
especificidades variados. Assim, a produção de anticorpos monoclonais específicos
contra o SARS-CoV-2 ainda apresenta grande relevância, sendo imprescindível verificar
sua capacidade neutralizante a cada nova variante emergente. Neste estudo, foi produzida
ECA2 recombinante solúvel por expressão transiente em células de mamíferos HEK 293F
e ExpiCHO para utilização no desenvolvimento de anticorpos monoclonais humanos com
finalidade terapêutica e diagnóstica da COVID-19. A proteína expressa apresentou boa
produtividade nas duas linhagens celulares (1,8 mg/mL e 3,4 mg/mL, respectivamente),
porém com diferentes padrões de glicosilação. A ligação da proteína recombinante à
proteína Spike do vírus original e das variantes Alfa e Gama foi confirmada em ensaios
de ELISA e citometria de fluxo. E a utilização da proteína recombinante em ensaios de
inibição da ligação à proteína viral de duas variantes, Alfa e Gama, por anticorpos contra
a Spike foi validada por citometria de fluxo, com inibição superior a 90% por três
diferentes clones.