Estudo proteômico das proteínas de Plasmodium falciparum exportadas até a membrana plasmá@ca das hemácias infectadas
Plasmodium falciparum, proteomics, exportome, membrane proteins, selec@ve bio@nyla@on, mass spectrometry
Plasmodium falciparum é o principal agente e@ológico da malária. Durante a fase eritrocitária do ciclo biológico, é capaz de remodelar intensamente os eritrócitos infectados, exportando diversas proteínas que alteram suas propriedades estruturais e funcionais. Esse conjunto de proteínas, conhecido como exportoma, desempenham papéis essenciais na adesão endotelial, evasão imune e aumento da permeabilidade da membrana. Apesar de sua importância, a composição funcional das proteínas exportadas até a superVcie da célula hospedeira ainda é pouco compreendida. Neste sen@do, o presente estudo teve como obje@vo caracterizar as proteínas exportadas por P. falciparum até a membrana plasmá@ca dos eritrócitos humanos por meio de análise proteômica. A estratégia experimental incluiu o cul@vo da cepa 3D7, sincronização com sorbitol e purificação de formas maduras por gradiente de Percoll®. Com o obje@vo de rotular as proteínas parasitárias expostas ou próximas à superVcie eritrocitária, foram empregadas três abordagens de bio@nilação sele@va: Sulfo-NHS-LC-Bio@na, MaleimidaPEG2-Bio@na e APEX2. As proteínas bio@niladas foram purificadas por afinidade com estreptavidina e analisadas por espectrometria de massas. Foram iden@ficadas diversas proteínas associadas à fração membranar, incluindo PfEMP1, RIFINs, STEVORs e KAHRP, todas amplamente reconhecidas por sua atuação na adesão e na modulação da resposta imune. Adicionalmente, foram detectadas proteínas relacionadas ao tráfego intracelular, ao citoesqueleto e ao complexo PTEX, sugerindo uma organização funcional complexa no processo de exportação. As proteínas iden@ficadas representam candidatos relevantes para o desenvolvimento de novas intervenções terapêu@cas e vacinais, por estarem expostas na interface parasito-hospedeiro. Este estudo contribui significa@vamente para o entendimento dos mecanismos moleculares de remodelamento eritrocitário induzido por P. falciparum e fornece uma base sólida para futuras inves@gações funcionais e translacionais.