Banca de DEFESA: NATHALIA FREITAS LIMA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : NATHALIA FREITAS LIMA
DATA : 08/08/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Plataforma Teams
TÍTULO:

Seleção e produção de anticorpos monoclonais ligantes ao Sars-Cov-2 pela técnica Phage Display e produção em bactérias

PALAVRAS-CHAVES:

Sars-Cov-2.Phage Display.Anticorpos monoclonais.ScFv.RBD.

PÁGINAS: 98
RESUMO:

A infecção pelo novo Coronavírus SARS-CoV-2, responsável pela Síndrome Respiratória Aguda Grave conhecida como Covid-19,resultou em uma grande pandemia a partir de março de 2020,com mais de 670 milhões de casos confirmados e cerca de 6,8 milhões de óbitos.A doença está associada a complicações respiratórias, mas também existem estudos que já comprovaram lesões em diferentes órgãos,mostrando inclusive que alguns pacientes apresentam sequelas até anos depois.Entre as estratégias de tratamento o desenvolvimento de novos anticorpos monoclonais se ressai por sua alta afinidade, maior especificidade, segurança farmacológica ,podendo ser utilizados também em kits de diagnóstico mais eficientes.Nesse sentido o objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de anticorpos específicos que se liguem ao SARS-CoV-2 com potencial de bloquear a infecção de células pelo vírus.Para isso desenvolvemos fragmentos de anticorpos denominados ScFv(Fragmento variável de cadeia única) utilizando uma biblioteca desenvolvida a partir do plasma de convalescentes,.Selecionamos em 4 rounds,utilizando dois tipos diferentes de antígenos, a subunidade de reconhecimento ao receptor hospedeiro (S1), e o domínio dessa proteína que é responsável pela ligação ao receptor (RBD). A estratégia foi imobilizar separadamente os antígenos em placas de ELISA e adicionar a biblioteca de fagos.A análise do progresso de seleção revelou que houve enriquecimento de anticorpos específicos ao antígeno viral,e 13 deles foram produzidos em altos níveis, em sistema heterólogo de células bacterianas, e purificados, por cromatografia de afinidade em coluna de Níquel.Foi demonstrado que os anticorpos recombinantes selecionados e produzidos apresentaram capacidade de ligação ao antígeno viral.Também foi mostrado que os anticorpos foram capazes de neutralizar a infecção por vírus Sars-Cov-2 in vitro. Esses dados evidenciam o potencial neutralizante dos anticorpos humanos desenvolvidos nessa pesquisa e revelam a relevância deles no desenvolvimento de metodologias eficientes e seguras de tratamento de infecções por vírus Sars-Cov-2. 

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2901079 - ANDRE MORAES NICOLA
Interno - 3141443 - BERGMANN MORAIS RIBEIRO
Interna - 1207115 - ILDINETE SILVA PEREIRA
Externa à Instituição - MARIA DE LOURDES BORBA MAGALHAES - UDESC