Banca de DEFESA: FILIPE DOS SANTOS TIMBONI

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : FILIPE DOS SANTOS TIMBONI
DATA : 23/05/2024
HORA: 09:00
LOCAL: Teams
TÍTULO:

CONSTRUÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE MUTANTES DE Cryptococcus neoformans COM DELEÇÕES DOS GENES PUTATIVOS DAS VIAS BIOSSÍNTÉTICAS DE FOSFATIDILCOLINA

PALAVRAS-CHAVES:

Cryptococcus neoformans; Virulência; Deleção gênica; Vias biossintéticas; fosfatidilcolina

PÁGINAS: 80
RESUMO:

Os fosfolipídios são moléculas fundamentais para a estrutura e função da membrana plasmática de células eucarióticas e procarióticas, além de estarem envolvidos no processo de adaptação ao meio ambiente e sinalização celular. Atualmente, diversos estudos exploram as vias de biossíntese de fosfolipídios como potencial alvo terapêutico contra fungos patogênicos, sendo assim, esse estudo teve por objetivo investigar o papel das vias de biossíntese de fosfatidilcolina na virulência do fungo Cryptococcus neoformans, através da construção e caracterização de mutantes knockout para os genes que codificam enzimas putativas de duas vias biossintéticas desse fosfolipídio. Os mutantes foram obtidos através de técnicas moleculares de deleção gênica por Double Joint-Polymerase Chain Reaction (DJ-PCR) e biobalística, e submetidos a testes fenotípicos para avaliar diferentes atributos associados à sua virulência. O mutante do gene OPI3, da via de novo, possui crescimento significativamente afetado na ausência de colina no meio de cultura, enquanto o duplo mutante opi3Δpct1Δ para as duas vias consegue crescer apenas na presença de extrato de levedura, ou em ágar gema de ovo. Ambos os mutantes induzem cápsulas polissacarídicas maiores que o selvagem KN99α, enquanto em testes de suceptibilidade a antifúngicos, o mutante do gene PCT1, da via alternativa Kennedy, apresentou maior suscetibilidade aos antifúngicos da classe dos azóis, como fluconazol e itraconazol. Os resultados indicam que essas vias estão associadas com outros mecanismos celulares, além da manutenção da integridade da membrana plasmática.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - MARCELO AFONSO VALLIM
Interno - 1787489 - ALDO HENRIQUE FONSECA PACHECO TAVARES
Presidente - 1657325 - LARISSA FERNANDES MATOS
Externo ao Programa - ***.915.251-** - RAFFAEL JUNIO ARAUJO DE CASTRO - WAUNI