Banca de DEFESA: Giovanna Alves de Sousa Dutra

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Giovanna Alves de Sousa Dutra
DATA : 27/07/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Meio virtual
TÍTULO:

" CARACTERIZAÇÃO PROTEÔMICA INTRACELULAR E EXTRACELULAR DE Corynebacterium glutamicum (ATCC 13032) NA PRESENÇA DE TWEEN 40 ".

PALAVRAS-CHAVES:

Corynebacterium glutamicum, produção de aminoácidos, proteômica bottom-up, glutamato.

PÁGINAS: 89
RESUMO:

Corynebacterium glutamicum é uma bactéria não patogênica amplamente utilizada na produção industrial de aminoácidos, moléculas que se encontram em terceiro lugar no mundo entre as mais produzidas por meio da fermentação, atingindo milhões de toneladas e com números crescentes no mercado mundial. C. glutamicum tem sido amplamente estudada, uma vez que os métodos tradicionais utilizados para produção de aminoácidos demandam um alto custo com isso, alternativas estão sendo buscadas a fim de baratear a produção e aumentar a produtividade. Nesse contexto, a proteômica tem desenvolvido papel fundamental para compreender e melhorar a eficiência de produção de aminoácidos, visto que o entendimento das vias de biossíntese depende da interpretação de análises proteômicas. Isso porque com a proteômica existe possibilidade de descrição e caracterização do funcionamento das vias metabólicas, sendo capaz de identificar modificações pós-traducionais (PTMs), além de ser apta para identificar a degradação de proteínas. Assim, o presente trabalho teve como objetivo geral identificar e caracterizar proteínas e complexos proteicos que participam das vias da biossíntese de aminoácidos dessa bactéria, com a influência de Tween 40 para produção de glutamato, por meio da abordagem proteômica de espectrometria de massas bottom-up, analisando o perfil proteico intracelular e extracelular. A análise de aminoácidos secretados pelo microrganismo resultou, no tempo de 18h de cultivo, a concentração de glutamato de 0,70 ± 0,14 mM na condição tween 40, enquanto na condição controle foi de 0,04 ± 0,02 mM (Teste t p<0,05). Os complexos proteicos foram separados via eletroforese BN-PAGE, apresentando complexos proteicos intracelulares variando entre 20kDa e 720kDa. Foram identificadas proteínas importantes para o metabolismo da C. glutamicum , como a enolase e a gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase , pertencentes a via glicolítica e a glutamina-sintetase, envolvida na biossíntese de glutamato. A análise do perfil proteico extracelular por SDS-PAGE apresentou proteínas entre 10 a 80 kDa, sugerindo diferença na abundância de algumas proteínas entre as condições. Na análise, bottom-up por LCMS/MS do secretoma, foi possível identificar algumas protéinas reguladas mais abundantes na condição com tween 40, como 2-oxoglutarato desidrogenase que é precursor da síntese de L-Glutamato. Tais resultados possibilitam a melhor compreensão do maquinário bioquímico envolvido na produção e secreção de aminoácidos por Corynebacterium glutamicum e, ajudar no aperfeiçoamento da sua manipulação científica em direção aos interesses biotecnológicos.

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 404930 - CARLOS ANDRE ORNELAS RICART - nullExterna ao Programa - 404838 - CONSUELO MEDEIROS RODRIGUES DE LIMA - nullExterno à Instituição - Gilvan Caetano Duarte - UFU
Presidente - 2772324 - LUIS HENRIQUE FERREIRA DO VALE