Banca de QUALIFICAÇÃO: FABIO WILLIAN MARTINS DA SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : FABIO WILLIAN MARTINS DA SILVA
DATA : 20/06/2024
HORA: 09:30
LOCAL: Plataforma Teams
TÍTULO:

Busca de marcadores moleculares no câncer oral para uso em biópsia liquida

PALAVRAS-CHAVES:

Câncer oral, marcadores moleculares, mutações, biópsia liquida, sequenciamento de nova geração

PÁGINAS: 30
RESUMO:

Introdução. O câncer oral é uma neoplasia que pertence aos subgrupos dos cânceres de cabeça e pescoço e pode ter origem nos lábios, língua, gengiva, palato mole e duro. É considerado um grande problema de saúde pública mundial, ocorrendo frequentemente em países em desenvolvimento. Mais de 90% dos cânceres orais são representados pelo carcinoma de células escamosas orais (CCEO). A grande maioria dos casos de câncer oral é diagnosticada em estágios avançados e está associada a linfonodos regionais acometidos e presença de metástase e alta taxa de mortalidade. Considerando os diagnósticos tardios e a baixa taxa de sobrevida dos pacientes com câncer oral, vários estudos vêm sendo realizados na busca de marcadores eficientes, utilizando proteínas, DNA, RNA ou metabólitos, no intuito de possibilitar um diagnóstico precoce e o monitoramento mais acurado do tumor. Porém, ainda não existe um biomarcador que seja clinicamente útil para uma detecção precoce ou para orientar melhor o manejo clínico dos pacientes com este câncer. Objetivo. Fazer a busca de marcadores moleculares associados com o câncer oral, que possam ser identificados não só no tecido tumoral, mas também no sangue destes pacientes, visando seu uso em biópsia líquida, que permitirá o monitoramento mais acurado do tumor com uma técnica menos invasiva. Métodos. Foi feita a extração de DNA utilizando o kit AllPrep DNA/RNA e após foi realizada a sua quantificação, utilizando o equipamento Qubit® 3.0 Fluorometer com o kit Qubit® dsDNA HS Assay. As bibliotecas foram preparadas usando o Kit Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Painel v2 (CHPv2) e os adaptadores com código de barras Ion AmpliSeqv2.0. Resultados Preliminares. Utilizando o painel Hotspot em 23 amostras de câncer oral, foram analisadas 2.800 mutações em 50 genes com envolvimento na carcinogênese. Dos 50 genes analisados, 33 estavam mutados, sendo que alguns genes apresentaram mais de uma mutação em um único paciente. Os genes TP53, PDGFRA, RET e FGFR3 estavam mutados em todos os pacientes (N=23), sendo que o gene TP53 apresentou diversas mutações e variantes com predominância da mutação missense c.215C>G. O gene PDGFRA apresentou, predominantemente, a mutação sinônima c.1701A>G e a c.2472C>T. O gene RET apresentou mutações sinônimas (c.2307G>T/c.2307G>C/c.2712C>G) e o gene HMGXB3/CSF1R, alterado em 91% das amostras, apresentou as seguintes mutações desconhecidas c.*1841T>A|c.*1841TG>GA|c.*36A>T|c.*36CA>TC. Perspectivas. A seguir, será realizado o teste de hibridização reversa, no equipamento Hybrispot 12, para detecção de 35 genótipos de HPV, objetivando associar estes dados com o perfil encontrado de mutações e com os dados clínicos dos pacientes. Finalmente, será feita a coleta de sangue de pacientes com câncer oral, com o objetivo de detectar as mutações validadas nestas amostras de sangue.A técnica de PCR digital será utilizada para detectar as mutações no DNA livre circulante extraído das amostras de sangue, no equipamento QuantStudioTM 3D Digital PCR System, com sondas de fluorescência específicas para as mutações selecionadas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2255360 - DORALINA DO AMARAL RABELLO RAMOS
Interna - 2731816 - JULIANA FORTE MAZZEU DE ARAUJO
Externa ao Programa - 1466126 - ELIZA CARLA BARROSO DUARTE - UnBExterna ao Programa - 2315081 - NILCE SANTOS DE MELO - UnB