Produção e caracterização funcional de proteínas salivares recombinantes de triatomíneos em Leishmania tarent
Doença de Chagas, Pallidipina, Tripsina, Triatoma infestans, Rhodnius neglectus.
A doença de Chagas é um importante problema de saúde pública na América Latina, onde áreas endêmicas coincidem com a distribuição geográfica dos triatomíneos. Durante o repasto sanguíneo, moléculas salivares bioativas do inseto garantem um fluxo sanguíneo contínuo, exercendo atividade vasodilatadora, anti-inflamatória, antiplaquetária, anticoagulante, imunomoduladora e anestésica; o que lhes confere grande potencial terapêutico. A identificação das moléculas presentes na saliva desses invertebrados revelou sua diversidade e abundância. A caracterização dessas moléculas poderá contribuir para o entendimento dos seus papéis junto a outros componentes salivares, bem como seu potencial como alvo para vacinas visando dificultar o repasto sanguíneo. O objetivo desse projeto é produzir proteínas salivares de triatomíneos em Leishmania tarentolae utilizando o sistema LEXSY, e realizar a caracterização bioquímica e funcional das proteínas recombinantes. As sequências nucleotídicas das proteínas salivares de interesse estão sendo clonadas no plasmídeo pLEXSY_I-blecherry3 (Jena Bioscience), que serão utilizados para transfecção de L. tarentolae. Após a seleção dos clones transformados, as proteínas serão produzidas e purificadas por cromatografia de afinidade. As proteínas purificadas serão utilizadas para realização de ensaios de avaliação da inibição da hemostasia. PALAVRAS-CHAVE: Doença de Chagas, Pallidipina, Tripsina, Triat