Banca de DEFESA: Gabriel dos Santos Silva

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Gabriel dos Santos Silva
DATA : 06/10/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Microsoft Teams
TÍTULO:

Integração de Estratégias Computacionais e Experimentais para a Investigação da Proteína Ligante de Odor (OBP) Salivar de Rhodnius neglectus, Vetor da Doença de Chagas

PALAVRAS-CHAVES:

: Proteína ligante de odorante; Rhodnius neglectus; Dinâmica molecular; Biologia estrutural.

PÁGINAS: 96
RESUMO:

O Rhodnius neglectus, um inseto da família Reduviidae (Hemiptera), é um potencial vetor do Trypanosoma cruzi, o protozoário responsável pela doença de Chagas. Na saliva do R. neglectus, encontram-se moléculas importantes que neutralizam os mecanismos de coagulação do hospedeiro, auxiliando na alimentação sanguínea e, indiretamente, na transmissão do protozoário. Por isso, a saliva desse inseto hematófago tem sido alvo relevante de estudos devido à presença de moléculas com alto potencial biotecnológico. Este trabalho teve como objetivo estudar uma Proteína de Ligação a Odorantes da saliva do R. neglectus (RnOBP) visando contribuir na compreensão de suas características estruturais e funcionais, utilizando abordagens computacionais e experimentais. Foram realizadas modelagens moleculares da RnOBP e ensaios computacionais de dinâmica molecular e clusterização para obter informações sobre a flexibilidade da proteína. Em seguida, foram realizados ensaios de docking molecular para verificar a afinidade da RnOBP com alguns ligantes relacionados à coagulação de vertebrados. Por fim, observou-se uma possível forma de oligomerização da RnOBP. Para a obtenção da RnOBP recombinante, a sequência nucleotídica da proteína foi obtida a partir do transcriptoma do R. neglectus, clonada no vetor de expressão pET100/DTOPO e produzida por bactérias Escherichia coli Rosetta(DE3)pLysS. A RnOBP recombinante foi purificada por cromatografia de afinidade, renovelada e utilizada em ensaios de caracterização biofísica. O modelo  cavidade interna significativa, potencialmente um sítio de ligação. Em comparação com outras OBPs de insetos, independentemente da composição ou classificação da OBP, a região do sítio de ligação é bem conservada. A RnOBP recombinante purificada a partir de corpos de inclusão revelou uma composição de estrutura secundária diferente da esperada. Os ensaios funcionais iniciais mostraram que a rRnOBP poderia atuar para inibir a agregação plaquetária, mas não a coagulação. Este estudo mostrou propriedades estruturais da RnOBP e pode contribuir para a compreensão de suas funções e potencial biotecnológico.

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - ***.125.178-** - AISEL VALLE GARAY - UnB
Presidente - 2088007 - CARLA NUNES DE ARAUJO
Externo à Instituição - CLEVER GOMES CARDOSO
Externa ao Programa - ***.924.081-** - PAULA BEATRIZ DE MEDEIROS SANTIAGO - UnB