AVALIAÇÃO DO POTENCIAL REGENERATIVO IN VITRO DE POLPAS DESCELULARIZADAS COMO SCAFFOLD BIOLÓGICO
Regeneração Pulpar; Descelularização; Matriz Extracelular; Polpa Descelularizada
“O tratamento endodôntico em dentes permanentes jovens com rizogênese incompleta, é desafiador. Nesse contexto, terapias regenerativas utilizando arcabouços derivados da matriz extracelular descelularizada (MECd) têm demonstrado grande potencial para promover a regeneração tecidual e restaurar a vitalidade do tecido pulpar. Estudo recente identificou a permanência de proteínas-chave relacionadas ao processo regenerativo endodôntico, como a Periostina (POSTN) e Fibrilina (FBN1) em MECd por proteômica nos dois protocolos utilizados neste trabalho. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar os tecidos pulpares descelularizados, analisar a morfologia da polpa dentária após a aplicação dos protocolos de descelularização e avaliar a interação das células-tronco da polpa dentária (DPSCs) com os produtos resultantes dessa MECd. Para isso foi realizada a análise da morfologia celular em contato com esses tecidos e suas respectivas apresentações em extrato e polpa dentária liofilizada. A descelularização dos tecidos pulpares foi conduzida com base em dois protocolos distintos: o protocolo descrito por MatougEwerfelli et al. (2018) e o de Song et al. (2017). Ensaios de migração, proliferação e viabilidade celular foram então realizados. A caracterização da polpa dentária foi conduzida por meio de ensaios de DAPI e extração de DNA. As alterações morfológicas foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV). A viabilidade celular e a proliferação foram avaliadas por meio do teste de exclusão com azul de tripano, enquanto a capacidade de migração celular foi determinada pelo método Scratch. Os resultados obtidos demonstraram que o tecido pulpar descelularizado apresenta grande potencial para a terapia endodôntica regenerativa, com destaque para a afinidade das células em contato com as matrizes e seus produtos, os quais puderam ser analisados por MEV. Além disso, o ensaio de citotoxicidade mostrou que os produtos derivados da matriz não causaram citotoxicidade quando em contato com as células, promovendo um aumento significativo na atividade metabólica. Nos ensaios de proliferação e migração, observou-se um aumento quantitativo na presença de todos os produtos derivados da matriz, evidenciando o potencial regenerativo do tecido pulpar descelularizado. Assim, os arcabouços descelularizados derivados da polpa dentária apresentam grande potencial para aplicações em tratamentos regenerativos endodônticos, promovendo a reparação de lesões pulpares e o desenvolvimento radicular. No entanto, estudos adicionais são necessários p