Banca de DEFESA: Giulia Oliveira Timo

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Giulia Oliveira Timo
DATA : 11/09/2024
HORA: 09:00
LOCAL: Plataforma Virtual Google Meet - https://teams.live.com/meet/9365314625233?p=kveJYUrOmZpXM5DRJS
TÍTULO:

Avaliação in vitro de fármacos reposicionados in silico contra Mycobacterium tuberculosis

PALAVRAS-CHAVES:

Mycobacterium tuberculosis; in silico; in vitro; reposicionamento de fármacos; toxicidade comparativa

PÁGINAS: 100
RESUMO:

Considerando a prevalência da tuberculose mundialmente, o aumento da resistência bacteriana e a falta de medicamentos inovadores no mercado, faz-se necessário o desenvolvimento de pesquisas que sejam capazes de enfrentar as dificuldades citadas. A utilização de metodologias in silico para o reposicionamento de fármacos tem sido capaz de diminuir falhas, tempo e recursos apresentados durantes as fases I e II da pesquisa clínica, visto que é capaz de realizar uma rápida varredura de milhares de moléculas contra um determinado alvo, otimizando o descobrimento ou o reposicionamento de novas terapias. Em estudo prévio, foi possível identificar uma série de fármacos passíveis de reposicionamento a partir da docagem molecular de milhares de moléculas aprovadas para uso no mercado com uma proteína transmembrana (MmpL3) e duas enzimas de Mycobacterium tuberculosis, a saber, RNA-polimerase, alvo da Rifampicina e Enoil-ACP-redutase, alvo da Isoniazida. Posteriormente, foi realizada uma análise in silico da toxicidade dos fármacos selecionados utilizando o software Nexus da Lhasa®. A partir das informações obtidas pelo programa e complementadas com dados de bases externas, foi desenvolvido um algoritmo e, consequentemente, um novo ranking dos fármacos foi determinado levando em conta a toxicidade. Como resultado, foram selecionados cinco fármacos (Carvedilol, Cetoconazol, Daclatasvir, Orlistate e Otilônio) com baixo risco toxicológico e com potencial de interação com M. tuberculosis para os estudos in vitro. Estes fármacos foram testados de forma individual e em associação com fármacos utilizados comumente na terapêutica da tuberculose contra as cepas H37Rv, CDC 1551, Erdman, mc26230 e XDR de M. tuberculosis para ensaios de MIC (minimum inhibitory concentration), FICI (fractional inhibitory concentration index), ensaio de Kill-kinetics, capacidade de indução de resistência e internalização com macrófagos. O estudo de MIC revelou que o Carvedilol, Orlistate e Otilônio foram os mais promissores individualmente e, durante o estudo de FICI, foi identificado que todos os três obtiveram sinergismo de atividade com pelo menos um dos fármacos padrão para tratamento da tuberculose. O estudo de kill-kinetics demonstrou que as associações ORL/INH, ORL/RIF, ORL/BED, CAR/INH e CAR/BED obtiveram efeito bactericida ao longo de 30 dias de tratamento e que o OTI demonstrou atividade bacteriostática em associações com INH e BED. Mais além, foi verificado que mesmo após a bactéria ser fagocitada por macrófagos, os fármacos ORL e CAR continuaram demonstrando atividade antimicobacteriana. Em experimento de indução de mutação espontânea, ORL demonstrou baixa capacidade de gerar resistência, enquanto CAR não demonstrou nenhum crescimento de cepas espontâneas. Em suma, a presente tese avaliou, utilizando ferramentas in silico e in vitro, fármacos disponíveis no mercado para reposicionamento contra M. tuberculosis, fornecendo assistência ao combate dessa doença secular.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - FABIANI GAI FRANTZ - USP
Externa à Instituição - GLAURA REGINA DE CASTRO E CALDO LIMA - LACEN-DF
Presidente - 1744566 - MAURICIO HOMEM DE MELLO
Interna - 1562111 - PEROLA DE OLIVEIRA MAGALHAES DIAS BATISTA
Interna - 2376979 - YANNA KARLA DE MEDEIROS NOBREGA