DESENVOLVIMENTO DE MÉTODOS ALTERNATIVOS AO USO DE ANIMAIS PARA AVALIAÇÃO DO DESEMPENHO E EFICÁCIA DE PRODUTOS FARMACÊUTICOS INOVADORES DE APLICAÇÃO OFTÁLMICA
Opthalmimic, modelo ocular in vitro, tempo de retenção, membranas poliméricas, modelo ocular ex vivo
A necessidade de testes de desempenho sem animais para a triagem de novas formulações oftálmicas é um desafio para as ciências farmacêuticas. Desta forma, desenvolvemos um novo método ex vivo de penetração ocular de fármacos com fluxo lacrimal simulado e um dispositivo inovador que simula a dinâmica e as barreiras físico-químicas do olho para avaliar o desempenho de medicamentos oftálmicos in vitro, o OphtalMimic. O modelo primeiro modelo com fluxo lacrimal simulado foi acoplado a Uma bomba de perfusão rotativa comercial (o sistema operou com fluxo de 48 µL/min durante os primeiros 2 minutos seguido de fluxo de 33 µL/min por 13 minutos de experimento, após a aplicação de 300 µL de formulação no compartimento doador). O sistema foi desafiado por diferentes formulações com diferentes viscosidades e propriedades mucoadesivas (solução; géis de poloxamer (PLX) a 14, 16 e 20% e gel de PLX a 16% com quitosana (CS) a 0,5, 1,0 e 1,25%). O modelo “Whole Eye Globe” com fluxo lacrimal simulado foi capaz de diferenciar formulações que continham componente mucoadesivo (CS) daquelas que não continham (somente PLX) em termos de quantidade de fármaco que penetrava na córnea (p<0,05). O modelo estático de tecido excisado convencional não só foi incapaz de diferenciar essas formulações (p>0,05), mas também resultou em cerca de 5 vezes a quantidade de droga penetrada em amostras que não possuíam o componente mucoadesivo, superestimando o desempenho da formulação. Já o novo dispositivo totalmente in vitro possui uma área exposta com uma córnea sintetizada estruturada à base de hidrogel de três camadas acomodada em uma base de suporte, sobre a qual reside uma pálpebra simulada, uma área simulada de beco sem saída e uma entrada e saída para bombeamento simulado. fluxo lacrimal. A base de apoio é montada em um motor que se move constantemente de 0° a 50°, o que também movimenta a pálpebra. O OphtalMimic foi desafiado por duas formulações de Fluconazol, um Poloxamer 16% (PLX16) e um Poloxamer 16% + Quitosana 1,0% (PLX16C10), formulação com maior viscosidade e propriedades mucoadesivas. Cada formulação foi testada com fluxo lacrimal simulado de 0,5 mL.min1 e tempo de teste de 10 minutos. Todo o líquido drenado foi coletado, diluído e analisado por LC-UV. O OphtalMimic foi capaz de diferenciar ambas as formulações drenando 72% ±4 e 65% ±3 do fármaco no PLX16 e no PLX16C10, respectivamente. Além disso, o desvio padrão relativo foi inferior a 5%, demonstrando a reprodutibilidade deste inovador dispositivo de teste de desempenho de produtos oftálmicos. O OphtalMimic é útil para comparar formulações, permitindo triagem de alto rendimento durante as fases de desenvolvimento, pesquisa e qualidade. Nossa perspectiva futura é acomodar uma córnea humana reconstruída na base de suporte e fornecer resultados dinâmicos em relação à permeabilidade do medicamento juntamente com o desempenho dinâmico das formulações testadas.