Banca de DEFESA: PEDRO FELIPE DE SOUSA QUEIROZ

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : PEDRO FELIPE DE SOUSA QUEIROZ
DATA : 20/08/2025
HORA: 10:00
LOCAL: Auditorio 1/IB
TÍTULO:

MÉTODO DIAGNÓSTICO BASEADO EM FRET-HCR E ATIVIDADE DE RIBOZIMAS PARA INFLUENZA AVIÁRIA (H5N1): PROGRAMA COMPUTACIONAL PARA ANÁLISE E PROCESSAMENTO DOS DADOS DE FLUORÍMETRO.

PALAVRAS-CHAVES:

Detecção molecular não proteica, H5N1, Ribozima e FRET-HCR.

PÁGINAS: 56
RESUMO:

O aumento expressivo no número de casos de influenza aviária representa uma ameaça global significativa, dada a alta patogenicidade do vírus H5N1, pertencente à família Orthomyxoviridae. Desde 2003, esse subtipo viral foi responsável por mais de 964 infecções humanas e 466 óbitos, resultando em uma taxa de letalidade aproximada de 60%. A recente identificação da transmissão viral para mamíferos, como bovinos leiteiros nos Estados Unidos e suínos, estes últimos reconhecidos como potenciais hospedeiros intermediários para humanos, intensificam a preocupação quanto ao risco de disseminação e adaptação interespécies. O Brasil, segundo maior produtor mundial de carne de frango, confirmou 171 casos da doença em aves silvestres, sete em aves domésticas e um em plantel comercial, levando à declaração de estado de emergência zoossanitária. Diante desse cenário, torna-se evidente a necessidade de estratégias diagnósticas mais acessíveis e eficazes, que permitam o rastreamento rápido da disseminação viral permitindo a aplicação de políticas públicas para a contenção. Embora métodos como PCR e ELISA apresentem alta sensibilidade e especificidade, suas limitações, como o elevado custo, a dependência de enzimas, a exigência por equipamentos especializados e a necessidade de cadeia de frio, dificultam sua implementação em larga escala, especialmente em regiões com infraestrutura limitada. Neste contexto, este estudo propôs a avalição de um sistema diagnóstico baseado na integração de ribozimas do tipo hammerhead a moléculas fluorescentes de DNA em formato de grampo. Essas foram projetadas para ativar uma Reação de Hibridização em Cadeia (HCR), resultando na formação de polímeros fluorescentes capazes de promover a Transferência de Energia por Ressonância Fluorescente (FRET), permitindo assim a detecção específica do material genético viral do subtipo H5N1. A metodologia envolveu o alinhamento de genomas do H5N1 para a identificação de regiões conservadas, a partir das quais foram desenhadas ribozimas e repórteres estruturadas em grampo. A validação experimental compreendeu ensaios de clivagem para aferição da atividade catalítica das ribozimas seguidos por ensaios de fluorescência para mensuração da intensidade do sinal FRETHCR em diferentes condições. O sistema contou ainda com um programa computacional, de fácil utilização, capaz de interpretar os sinais emitidos e apresentar os resultados de forma gráfica. Os resultados obtidos demonstraram a viabilidade do sistema proposto na detecção específica do H5N1, com elevada seletividade frente à variante H7N9, evidenciando seu potencial como uma ferramenta diagnóstica alternativa, acessível, rápida e independente de atividade proteica.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2518326 - CINTIA MARQUES COELHO
Externa ao Programa - 1207115 - ILDINETE SILVA PEREIRA - nullExterna à Instituição - PRISCILA GRYNBERG