CRIOPRESERVAÇÃO DE CALOS E RESPOSTAS À INDUÇÃO DA EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA E À REGENERAÇÃO DE PLANTAS EM MULTIPLOS ACESSOS DE CACAUEIRO (Theobroma cacao L.)
Calogênese, Embriogênese somática, Germoplasma, Criopreservação
O Brasil possui um dos maiores Bancos de Germoplasma de cacaueiro do mundo com mais de 4,5 mil acessos conservados em campo. Apesar de ocupar essa posição de destaque tanto quanto ao número como em diversidade, tais acessos correm risco iminente de serem perdidos em razão da vulnerabilidade frente a condições ambientais adversas. Neste trabalho, objetivou-se avaliar estratégias de conservação ex situ de cacaueiros, a partir de diferentes acessos, tipos de explantes e metodologias de criopreservação. Para tanto, foram avaliados dois acessos não comerciais (752 e 762) e dois tipos de explantes (estaminódios inteiros e parte basal de estaminódios). O trabalho consistiu em analisar respostas de pré-tratamentos de criopreservação, como a dessecação em sacarose, tempos de imersão em loading solution (LS) e plant vitrification solution (PVS2), além da avaliação das técnicas de vitrification, droplet vitrification e slow cooling (- 80) sobre a manutenção da viabilidade de estaminódios com calos, previamente induzidos em meio de indução de calos. Amostras submetidas a esses tratamentos foram analisadas anatomicamente para verificar o potencial embriogênico e/ou alguma resposta adversa a esses tratamentos. Em segundo experimento, foram avaliadas diferenças genotípicas de 24 genótipos não comerciais de cacaueiros quanto à embriogênese somática. Estaminódios dos diferentes genótipos foram inoculados em meio de indução de calos, para avaliar a capacidade de formação e multiplicação de calos, e posteriormente em meios de desenvolvimento de embriões somáticos e formação de plantas, para avaliar a capacidade diferenciação de embriões e posterior regeneração. Quanto aos experimentos de criopreservação, verificou-se que estaminódios com a presença de calos na base do explante viáveis para o desenvolvimento de um protocolo de conservação sob ultrabaixas temperaturas, pois mantêm a sua viabilidade. Contudo, manipulações futuras são necessárias para garantir a regeneração pós criopreservação. Quanto ao segundo experimento, constatou-se efeito genotípico sobre o potencial embriogênico, com alguns genótipos apresentando mais responsividade a essa rota de micropropagação do que outros.