Banca de DEFESA: Rennan Oliveira Meira

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Rennan Oliveira Meira
DATA : 26/04/2023
HORA: 14:00
LOCAL: videoconferência
TÍTULO:

"Transformação genética e respostas ao estresse oxidativo de genitores de palma de óleo (Elaeis spp.) contrastantes quanto à capacidade de aquisição da competência embriogênica"

PALAVRAS-CHAVES:

Arecaceae, embriogênese somática, meio líquido, célula vegetal, biobalística, sistema antioxidante.

PÁGINAS: 71
RESUMO:

A palma de óleo (Elaeis guineensis Jacq.) é uma espécie oleaginosa de grande importância econômica em razão do óleo extraído dos frutos. A embriogênese somática é uma prática que vem sendo utilizada para a propagação dessa espécie e, o estresse tem sido associado diretamente à indução de calos durante a indução da embriogênese somática em palma de óleo. O foco da transformação genética em palma de óleo tem sido especialmente o de aumentar os teores de ácido oleico, no entanto, essa metodologia ainda apresenta alguns obstáculos. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos: 1) avaliar as respostas ao estresse oxidativo, mediada pela atividade de enzimas do sistema antioxidante, bem como a peroxidação lipídica, de dois genótipos de palma de óleo (E. guineensis Jacq. var. Pisifera), durante a indução da embriogênese somática e; 2) testar a eficiência da transformação genética em calos embriogênicos de palma de óleo, por meio de biobalística. Nas respostas ao estresse foram utilizados os palmitos oriundos de duas plantas adultas de E. guineensis Jacq. var. Pisifera. A indução de calos foi realizada com meio MS suplementado com 450 μM de Picloram, cultivados por dois subcultivos de 45 dias cada. Aos 90 dias de indução foram avaliadas a percentagem de formação de calo, a percentagem de oxidação dos explantes e a percentagem de contaminação. Para as análises bioquímicas e enzimáticas as amostras foram coletadas de ambos os genótipos, aos 7, 15, 30, 90 e 180 dias após o início do cultivo. Foram analisadas as proteínas solúveis totais e a atividade enzimática da peroxidase (POD). O genótipo responsivo foi o A26.50.6 com valores de formação de calos aos 90 dias de 9,3%, enquanto o não responsivo não apresentou formação de calo no mesmo período. Os resultados referentes aos teores de proteínas solúveis totais, mostraram-se estatisticamente diferente entre os genótipos. Quanto aos teores da atividade da enzima POD, não diferiram no tempo zero, essa diferença foi observada aos 7 dias de indução, na qual o genótipo não responsivo apresentou um pico de atividade 9,93±1,83 µmol de purpurogalina/min/mg prot, e a partir do décimo quinto dia a atividade da POD foi elevada para ambos os genótipos, no entanto, o genótipo responsivo foi o que apresentou os maiores valores de atividade enzimática, assim como a alta taxa de formação de calos. Com relação ao processo de transformação dos calos embriogênicos foi realizado utilizando-se o plasmídeo pMONORNAiBAR-FAD, por meio de biobalística, constituída da aceleração de micropartículas de tungstênio, co-cultivado com o agente de pressão de seleção glufosinato de amônio (4 mg. L-1 ). Aos 90 dias após o procedimento, ambos os tratamentos apresentaram moderada oxidação, apenas o T2 demonstrou contaminação (37,5%), já o T1 teve a maior taxa de sobrevivência (53,1%). Quanto à formação de embriões somáticos, o T1 e T2 alcançaram valores de 12,5% e 20% respectivamente, além disso, o T2 apresentou cerca de 23 embriões somáticos, que resultaram na regeneração de 21 plantas. Na identificação indireta não foi possível detectar nenhum evento de transformação. Os resultados sugerem uma otimização ao protocolo de transformação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 583.320.220-53 - JONNY EVERSON SCHERWINSKI PEREIRA - EMBRAPA
Interna - 1556591 - CRISTIANE DA SILVA FERREIRA
Externa à Instituição - GLAUCIA BARBOSA CABRAL - EMBRAPA
Externo à Instituição - FREDERICO HENRIQUE DA SILVA COSTA - UNIFESSPA
Externa à Instituição - ZANDERLUCE GOMES LUIS - UNIFESSPA