"Embriogênese somática em variedades de cacau (Theobroma cacao L.)".
cultura de tecidos, calogênese, anatomia.
Introdução: O cacaueiro (Theobroma cacao L.), uma espécie lenhosa da família Malvaceae, é uma cultura de grande importância cultural e econômica no mundo, devido principalmente, à produção de chocolate. No entanto, cerca de 38% do cacau cultivado é perdido anualmente devido a pragas e doenças, e também, à dificuldade de armazenamento, graças à recalcitrância das sementes. Devido à base genética estreita e ao longo ciclo de vida, programas de melhoramento genético são demorados, o que torna necessário o desenvolvimento de métodos de propagação mais eficientes para a multiplicação de genótipos de interesse, como a embriogênese somática. Objetivo: O objetivo deste trabalho é desenvolver um protocolo otimizado de embriogênese somática em variedades de cacau, além de descrever e caracterizar anatomicamente diferentes tipos de calos e embriões somáticos obtidos durante as diferentes etapas do processo. Metodologia: Este estudo foi realizado na Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, em Brasília-DF. Explantes formados por estaminoides foram coletados de flores de três plantas matrizes (752, 754 e 755) e cultivados em meios de cultura baseados na pesquisa de Li e colaboradores (1998), adicionado das citocininas cinetina e meta-Topolina nas concentrações de 0; 0,5 e 1,0 mg L-1, seguindo um delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial triplo (3 genótipos × 2 citocininas × 3 concentrações). Os tratamentos foram formados por 5 repetições de 10 estaminoides cada. Resultados: No processo de embriogênese somática houve a formação de calos após duas semanas e o surgimento de embriões somáticos em dez semanas. Foram identificados e diferenciados dois tipos de calos durante a execução do experimento, denominados de granular e nodular. O genótipo “754”, no tratamento controle e no tratamento com adição de 1 mg L-1 de cinetina, destacou-se na taxa de formação de embriões somáticos. Durante a fase de desenvolvimento de embriões somáticos, verificou-se alta taxa de oxidação dos explantes, sobretudo daqueles oriundos do tratamento controle, o tratamento mais responsivo ao desenvolvimento de embriões. Conclusões: O estudo demonstrou a existência de variação genotípica na resposta da embriogênese somática em cacau. A oxidação dos calos não afetou a formação de embriões e a região basal do estaminoide é a mais responsiva. A adição das citocininas testadas não aumentou significativamente a geração de embriões somáticos. Portanto, o meio originalmente estabelecido por Li e colaboradores ainda pode ser usado como padrão comercial para genótipos como os estudados neste trabalho, não sendo necessária a adição das citocinina, apesar do relato em outros genótipos.