Banca de DEFESA: Natalia Ernandes Capobianco

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Natalia Ernandes Capobianco
DATA : 31/08/2022
HORA: 08:00
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO:

"Dna livre de célula no plasma seminal de touros nelore: possível marcador para qualidade e congelabilidade do sêmen"

PALAVRAS-CHAVES:

cfDNA; congelabilidade; plasma seminal; produção in vitro de embriões.

PÁGINAS: 73
RESUMO:

A criopreservação de sêmen é uma técnica de grande impacto utilizada na produção animal. Apesar de bem estabelecida em algumas espécies, a resposta à criopreservação e a capacidade de produzir embriões in vitro varia de indivíduo para indivíduo. Assim, a identificação de um marcador que possa indicar a congelabilidade e fecundidade da amostra, antes do congelamento, seria de grande valia para a indústria de sêmen. Buscando uma nova avaliação que possa predizer a qualidade espermática pós-descongelamento, este estudo avaliou a quantidade de DNA livre de células e o número de cópias de mtDNA no plasma seminal de touros Nelore. O sêmen de nove touros foi coletado por eletroejaculação, metade do ejaculado foi utilizado para avaliação do sêmen fresco e obtenção do plasma seminal para quantificação de cfDNA, a outra metade foi criopreservada. A avaliação de movimento espermático pelo CASA (IVOS 12.3/Hamilton-Thorne, EUA) e da integridade e estabilidade da membrana plasmática, integridade acrossomal, apoptose e potencial mitocondrial, por citometria de fluxo, (AMNIS FlowSight - Amnis Corp., EUA) foram realizados no sêmen fresco e sêmen congelado/descongelado às 0, 3, 6 e 12h após o descongelamento. O sêmen criopreservado também foi utilizado para a produção de embriões in vitro. A quantificação de cfDNA foi realizada por espectrofotometria e o número de cópias do mtDNA foi quantificado por qPCR. A concentração de cfDNA presente no plasma seminal variou de 15,23 ng/μL a 519,71 ng/μL. A mediana foi calculada (58,95) e dois grupos foram definidos de acordo com a concentração de cfDNA: LowcfDNA (<58,95 ng/μL; n=5) e HighcfDNA (>58,95 ng/μL; n=4). O número de cópias de mtDNA foi semelhante (P>0,05) entre os grupos. No sêmen fresco, a porcentagem de células com estabilidade de membrana foi maior (P<0,05) no grupo LowcfDNA (84,24%) comparado ao grupo HighcfDNA (52,72%) e, ao longo de 12 horas pósdescongelamento, não houve diferenças para todos os parâmetros avaliados entre os grupos. A taxa de clivagem e de blastocistos em D7 foi maior para o grupo HighcfDNA (60.74% ± 3.38 e 24.95% ± 2.56, respectivamente), do que para o grupo LowcfDNA (41.21% ± 3.23 e 6.42 ± 1.14). O grupo HighcfDNA também produziu embriões de melhor qualidade. A concentração de cfDNA no plasma seminal não é capaz de predizer a congelabilidade do sêmen, mas animais com maior quantidade de cfDNA são capazes de produzir in vitro mais embriões e de melhor qualidade.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - MAURÍCIO MACHAIM FRANCO - EMBRAPA
Externo à Instituição - JOSE FELIPE WARMLING SPRICIGO - UFG
Externo à Instituição - LIGIANE DE OLIVEIRA LEME - UFES
Presidente - 395.928.980-49 - MARGOT ALVES NUNES DODE - EMBRAPA