Banca de DEFESA: SOPHIA GARCIA DE RESENDE

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SOPHIA GARCIA DE RESENDE
DATA : 25/08/2025
HORA: 09:30
LOCAL: Auditório3 IB
TÍTULO:

Método de detecção para dengue baseado no uso de ribozimas e transferência de fluorescência por reação de hibridização em cadeia (FRET-HCR)

PALAVRAS-CHAVES:

Dengue. Ribozimas. FRET-HCR. Detecção molecular não-enzimática

PÁGINAS: 72
RESUMO:

A crescente disseminação e incidência do vírus da dengue (DENV) é uma preocupação mundial, com mais de 14 milhões de casos e 11 mil óbitos em 2024. No Brasil, desde 2023, foram notificados 9.7 milhões de casos prováveis e 8.713 óbitos associados ao vírus. Esse cenário evidencia a urgência por soluções mais eficazes, já que as técnicas atuais apresentam limitações, como altos custos logísticos decorrentes da dependência de amplificação enzimática e da exigência de mãode-obra qualificada e equipamentos especializados. Soma-se a isso a sobreposição clínica dos sintomas de DENV com outros arbovírus circulantes, como Zika e Chikungunya, reforçando a demanda por métodos que unam sensibilidade, especificidade e acessibilidade. A detecção precisa e sensível do DENV é essencial para o manejo clínico diferencial, vigilância epidemiológica, desenvolvimento científico e testes vacinais. Ribozimas — RNAs catalíticos envolvidos em mecanismos ribossômicos e de splicing— são estudadas desde os anos 1980 em aplicações terapêuticas e diagnósticas. Paralelamente, técnicas fluorescentes baseadas em ácidos nucleicos demonstram potencial na detecção de sequências virais. Neste estudo, apresenta-se uma estratégia diagnóstica inovadora e livre de enzimas para DENV, que integra ribozimas hammerhead a sondas de DNA fluorescentes em estrutura de grampo. Essas sondas iniciam uma Reação de Hibridização em Cadeia (HCR, do inglês Hybridization Chain Reaction), formando polímeros fluorescentes capazes de promover Transferência de Energia por Ressonância Fluorescente (FRET, do inglês Fluorescence Resonance Energy Transfer), viabilizando a detecção específica do genoma viral. No desenvolvimento do método, sequências genômicas do DENV de dados públicos foram alinhadas e selecionadas manualmente a fim de identificar regiões altamente conservadas; a partir delas, ribozimas e sondas de DNA foram desenhadas. A validação experimental envolveu ensaios de clivagem para análise da atividade das ribozimas, seguidos por ensaios de fluorescência para quantificação do sinal FRET-HCR em diferentes condições. Os resultados demonstraram detecção específica e eficaz do RNA de DENV, com mínima reatividade cruzada frente a Zika e Chikungunya. Essa abordagem configura uma promissora ferramenta diagnóstica de acessível, rápida e independente de enzimas

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 2518326 - CINTIA MARQUES COELHO
Externo à Instituição - DANIEL OLIVEIRA DA MATA - UnB
Externa ao Programa - 1677467 - DANIELA MARA DE OLIVEIRA - nullExterna à Instituição - ROSÂNGELA VIEIRA DE ANDRADE - UCB