Banca de DEFESA: Joyce Silva dos Santos

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Joyce Silva dos Santos
DATA : 10/04/2023
HORA: 14:30
LOCAL: Meio virtual
TÍTULO:

Caracterização das propriedades biológicas de uma dermaseptina isolada da secreção cutânea de Pithecopus rohdei (Anura: Phyllomedusidae)

PALAVRAS-CHAVES:

anuros; Pithecopus rohdei; secreção da pele; peptídeo antimicrobiano; Dermaseptinas; neutrófilos; quimiotaxia; Polimixina B; KPC; sinergismo.

PÁGINAS: 20
RESUMO:

O uso indiscriminado de antibióticos tem provocado elevados níveis de resistência bacteriana ao redor do mundo. Esse cenário se intensificou significativamente após o período pandêmico de SARS- COV 2, onde agentes antimicrobianos foram utilizados desenfreada e erroneamente, mesmo que indicados apenas no caso de confeição com bactérias ou fungos. Com isso, ocorreu um aumento expressivo de superbactérias resistentes, levando à necessidade do uso de antibióticos de alto espectro e graves efeitos colaterais, como é o caso da Polimixina B, um medicamento associado a intensa nefrotoxicidade e uma das últimas alternativas de tratamento para superbactérias hospitalares. Diante disso, pesquisas envolvendo moléculas com potencial antimicrobiano são de grande importância para a sociedade e tem ganhado espaço no meio científico. Uma interessante opção para esse quadro é o estudo de moléculas antimicrobianas naturais, como é o caso dos peptídeos antimicrobianos (PAMs) também chamados de peptídeos de defesa do hospedeiro (PDHs). Esses peptídeos são moléculas curtas, catiônicas, anfipáticas e abundantes na natureza, sendo muito encontrados na secreção cutânea de anfíbios. Nesse trabalho, foi isolado um potente peptídeo antimicrobiano presente na secreção cutânea de Pithecopus rohdeii, uma espécie da família Phylomedusidae. A fração ativa foi isolada por cromatografia líquida de alta eficiência e apresentou uma massa de 3080,66 Da. A molécula foi sequenciada por degradação de Edman e apresentou uma sequência peptídica de 30 resíduos de aminoácidos (GLWKMLAKGAGKVLGHVASKFLGSQGQPES-COOH). Por estudos de similaridade de sequência, foi observado que esse peptídeo possui alta similaridade de sequência com peptídeos da classe das dermaseptinas, sendo então denominado Dermaseptina PR-1 (PR em referência à espécie Pithecopus rohdei). Através de análises de dicroísmo celular (DC), a estrutura secundária do peptídeo na presença de SDS e TFE foi avaliada, sendo possível inferir que a Dermaseptina PR-1 forma uma estrutura em alfa-hélice quando em contato com as membranas, um padrão associado à respostas antimicrobianas em outros peptídeos de defesa. No que diz respeito a testes biológicos, o peptídeo apresentou resultados inibitórios no crescimento das bactérias Grampositivas Staphylococcus aureus (CIM = 4 M), Staphylococcus epidermidis (CIM = 4 M) e Enterococcus faecalis (CIM = 16 M) e Gram-negativas Escherichia coli (CIM = 1 M), Klebsiella pneumoniae (CIM = 2 M) e Pseudomonas aeruginosa (CIM = 4 M), sendo observado, também, a atividade antibacteriana em um isolado clínico multirresistente de Klebsiella pneumoniae carbapenemase, resultado que foi corroborado por teste de microscopia eletrônica de varredura(MEV) onde se pôde observar a formação de poros e profundas rugosidades na membrana dessa bactéria, que leva a desestruturação da parede e lise do microrganismo. Além disso, como um teste preliminar para avaliar a capacidade inunomodulatória dessa dermaseptina, o peptídeo foi testado quanto a sua capacidade de induzir a quimiotaxia de neutrófilos, onde se observou uma moderada atividade quimiotática. Esses resultados sugerem que o peptídeo pode atuar de forma dupla, erradicando bactérias de maneira direta e indireta. Por fim, a atividade hemolítica do peptídeo foi avaliada e resultou em um baixo percentual de hemólise nas concentrações relacionadas aos valores de CIMs de bactérias sensíveis (2% a 9% ) observando-se também uma moderada atividade hemolítica na concentração inibitória da superbactéria Klebsiella pneumoniae carbapenemase (23%).

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 404930 - CARLOS ANDRE ORNELAS RICART
Presidente - 1189826 - MARIANA DE SOUZA CASTRO
Externo à Instituição - MARLON HENRIQUE E SILVA CARDOSO - UFMS
Interno - 1354514 - OSMINDO RODRIGUES PIRES JUNIOR