Banca de DEFESA: Larissa Verginia do Nascimento Miranda

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Larissa Verginia do Nascimento Miranda
DATA : 07/12/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO:

"PRODUÇÃO EM LARGA ESCALA DA LACASE 1 RECOMBINANTE DE Cryptococcus neoformans NO SISTEMA DE EXPRESSÃO HETERÓLOGA Pichia Pastoris".

PALAVRAS-CHAVES:

Pichia Pastoris, Laccase 1, Cryptococcus neoformans, produção em larga escala, expressão heteróloga

PÁGINAS: 67
RESUMO:

A meningoencefalite causada pelo fungo Cryptococcus neoformans em pacientes imunocomprometidos, principalmente em pacientes com HIV, tem causado aproximadamente 122 mil mortes por ano. Os mecanismos de infecção e sua virulência são objeto de intensa investigação. A melanização do fungo é um dos fatores que aumenta sua virulência, e é catalisada por uma enzima chamada lacase 1 (Lac1). Além da atividade descrita, constatou-se que essa enzima pode ser um dos fatores que permite a sobrevivência do fungo no próprio líquido cefalorraquidiano (LCR), contribuindo para sua permanência no encéfalo. A levedura, Pichia pastoris, é um bom modelo para produção de proteínas. A cepa X-33 dessa levedura foi transformada por um plasmídeo contendo a sequência codante de Lac1, com o objetivo de produção de lacase recombinante. A expressão da enzima nos transformantes foi testada por ABTS, otimizada por testes de produção temporal e foi visto que, em frasco, diferentes tempos de indução não causam diferença significativas na produção da proteína. Além disso, entendeu-se que a Lac1 possui sensibilidade a alterações de pH, com atividade entre as faixas de 5,1 - 6,1 e que o aumento de escala leva a uma necessidade de aumento da frequência do fluxo de alimentação com o indutor metanol.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - HERDSON RENNEY DE SOUSA - CBM-DF
Externa ao Programa - 1657325 - LARISSA FERNANDES MATOS - nullPresidente - 2095134 - PATRICIA ALBUQUERQUE DE ANDRADE NICOLA
Externa à Instituição - VIVIANE CASTELO BRANCO REIS - UnB