Banca de QUALIFICAÇÃO: Jemima Aila Assunção Vital

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : Jemima Aila Assunção Vital
DATA : 31/03/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Virtual
TÍTULO:

"Expressão Heteróloga de asparaginase de Fusarium e Penicillium. Vetor de Expressão constitutiva de baixa expressão pSFOXB1."

PALAVRAS-CHAVES:

Leucemias; L-Asparaginase; Produção, Expressão Heteróloga, Penicillium, Fusarium.

PÁGINAS: 79
RESUMO:

A enzima L-asparaginase é utilizada no tratamento da Leucemia Linfoblástica aguda (LLA) no Brasil e no Mundo. No Brasil, já se tem um protocolo de tratamento desenvolvido pelo Instituto Nacional de Câncer (INCA) de 2001, utilizando L -asparaginases de origem bacteriana, principalmente de Escherichia coli e Erwinia chrysanthemi. No entanto, as enzimas de origem procariótica apresentam reações adversas e toxicidade, que podem levar à suspensão de sua utilização no tratamento de LLA em alguns pacientes. Desta forma, ainda existe a demanda por fontes alternativas de L-asparaginases tão eficientes quanto às já comercializadas, mas que apresentem menos reações adversas e toxicidade, assim como, sejam produzidas com maior rendimento. Ainda considerando o cenário no Brasil, o SUS apresenta dificuldade no seu abastecimento uma vez que esta enzima é importada. Neste cenário, a presente proposta de pesquisa teve como meta central a obtenção de enzimas de origem eucariótica, fungos filamentosos P. sizovae e F. proliferatum, por expressão heteróloga para avaliar a sua utilização no desenvolvimento de formulação estável para tratamento de LLA com menos reações adversas e toxicidade e em processo nacional que possa levar à sua produção em larga escala. As sequências dos genes de asparaginases de P. sizovae e F.proliferatum foram obtidos em trabalho anterior, sintetizados e clonados no vetor pET28A pela empresa genone. No presente trabalho, os genes foram subclonados nos vetores da série pSFOXB (pSFOXB1, 11 e 15) , para avaliar a viabilidade de processo de produção por expressão constitutiva em oposição ao indutivo (pET28A). Foram obtidos clones transformantes para cada uma das construções que estão sendo analisados quanto à presença do inserto e posteriormente, serão analisados quanto à produção da proteína de interesse, presença e atividade. Uma vez obtidas as asparaginases heterólogas estas serão avaliadas na formulação de um fármaco à base de Lasparaginase, meta do projeto no qual a presente proposta de pesquisa está inserida. Dentre estas análises serão realizados estudos de toxicidade e melhoramento de fármacos através de modificações químicas ou moleculares no produto original, visando redução da toxicidade do produto final, redução da imunogenicidade e alterar sua farmacocinética e a farmacodinâmica.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - ALONSO ROBERTO POMA TICONA - UnB
Externa à Instituição - BRENDA RABELLO DE CAMARGO - UnB
Presidente - 2222088 - ELIANE FERREIRA NORONHA
Interna - 3333449 - JANICE LISBOA DE MARCO