"ABORDAGENS MULTIÔMICAS PARA COMPREENDER A HISTÓRIA EVOLUCIONÁRIA, CAPACIDADES DE ADAPTAÇÃO E BIOPROSPECÇÃO DE QUATRO FUNGOS ENDOPÍTICOS"
Genômica; Metabolômica; Diaporthe; Fusarium; Phyllosticta; UHPLC-ESI-MS/MS
Os fungos endofíticos (EFs) formam associações íntimas com as plantas, residindo em seus tecidos sem causar danos aparentes. Compreender a evolução dos genomas dos fungos endofíticos é essencial para descobrir os mecanismos que impulsionam as suas relações simbióticas com as plantas hospedeiras. Os EFs também são conhecidos por sintetizar uma ampla gama de metabólitos secundários que podem atuar para promover a aptidão de seus hospedeiros sob condições de estresse abiótico. Muitos desses metabólitos apresentam atividade biológica de interesse humano, como atividade antimicrobiana, antioxidante e inseticida. No entanto, as características genômicas detalhadas e o potencial biossintético desses microrganismos não foram extensivamente estudados usando metodologias “ômicas”, como genômica e metabolômica. Nesse sentido, o presente trabalho tem como objetivo estudar quatro espécies de quatro fungos endofíticos isolados de Ouratea hexasperma (A. St.-Hil.) Baill. (Ochnáceas). Os atributos avaliados incluem o estudo do i) genoma; ii) o metaboloma; iii) potencial antimicrobiano, antioxidante e inseticida dos metabólitos produzidos por estes microrganismos; e iv) a capacidade desses microrganismos em promover a aptidão de Arabidopsis thaliana e Nicotiana tabacum sob condições de estresse abiótico causado por solos ácidos e ricos em alumínio nativos do Cerrado. Os fungos endofíticos selecionados pertencem a duas espécies de Fusarium, uma de Diaporthe e outra de Phyllosticta. O genoma das quatro espécies foi sequenciado utilizando a plataforma Illumina. Utilizamos análise UHPLC-ESI-MS/MS e plataforma GNPS para estudar o extrato bruto, extraído com acetato de etila (EtOAc), de isolados cultivados em caldo PD (batata e dextrose) e cultura de extrato de levedura de malte (caldo MY) com e sem suplementação de alumínio. Para avaliar a capacidade dos fungos em promover a aptidão das duas plantas modelo em solo ácido rico em alumínio, os isolados serão cultivados em caldo MY com e sem suplementação de alumínio. Após o cultivo, o caldo contendo o micélio será inoculado no solo onde as plantas serão plantadas. A atividade inseticida dos extratos será avaliada contra Galleria mellonella e Tenebrio molitor. A atividade antimicrobiana será avaliada frente aos fitopatógenos Colletotrichum musae, Phytophthora soyae e P. palmivora. A capacidade antioxidante dos extratos será determinada utilizando o método de eliminação de radicais DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazil) e redução de íons Fe 3+ por ortofenantrolina. Como produto, esta tese gerará 9 artigos.