Banca de DEFESA: MARIANA BRACCIALLI DE LOYOLA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : MARIANA BRACCIALLI DE LOYOLA
DATA : 08/12/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Auditório 1 - FS
TÍTULO:

Avaliação funcional do knockout de SETD4 por CRISPR/Cas9 em leucemia linfoide aguda

PALAVRAS-CHAVES:

Metiltransferase, Epigenética, Leucemia Linfoide Aguda.

PÁGINAS: 84
RESUMO:

Apresenta elevada heterogeneidade molecular, e evidências crescentes indicam que mecanismos epigenéticos influenciam a proliferação e a resposta terapêutica. A metiltransferase SETD4 regula a metilação de lisinas em histonas e modula programas transcricionais associados à carcinogênese. Este trabalho tem como objetivo avaliar o papel biológico de SETD4 em modelos celulares de LLA e investigar sua associação com proliferação celular e resposta ao Metotrexato (MTX). Inicialmente, analisamos dados transcriptômicos das plataformas TCGA, cBioPortal e BloodSpot para examinar o padrão de expressão de SETD4 e identificar vias enriquecidas em pacientes com alta e baixa expressão. Em seguida, conduzimos experimentos funcionais em duas linhagens de LLA-B: Nalm-6, de baixa expressão endógena de SETD4, e REH, cuja expressão é elevada. Na Nalm-6, induzimos a superexpressão de SETD4 por meio de vetor de expressão; na REH, reduzimos a expressão do gene utilizando siRNA. Também desenvolvemos modelos iniciais utilizando CRISPR/Cas9 com vistas à geração futura de clones knockout. Avaliamos os efeitos dessas manipulações na proliferação celular e na sensibilidade ao MTX. Nossas análises in silico demonstram que SETD4 encontra-se superexpresso em um subconjunto de amostras de LLA-B, especialmente naquelas com a translocação t(12;21), e mostram que pacientes com alta expressão apresentam enriquecimento de vias proliferativas, incluindo E2F, G2/M checkpoint, MYC e reparo de DNA. Experimentalmente, observamos que a superexpressão de SETD4 aumenta a proliferação de Nalm-6, enquanto o silenciamento reduz a proliferação de REH, confirmando um papel próproliferativo. Além disso, verificamos que células com níveis elevados de SETD4 apresentam maior sensibilidade ao MTX, enquanto a redução da expressão diminui a resposta ao fármaco. Esses resultados indicam que SETD4 atua como regulador positivo da proliferação e da sensibilidade ao MTX em LLA-B, reforçando seu potencial como biomarcador e alvo molecular para investigações futuras.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1643347 - FABIO PITTELLA SILVA
Externa ao Programa - 2492352 - IZABELA MARQUES DOURADO BASTOS CHARNEAU - nullExterno à Instituição - RICARDO CAMARGO - HCB
Externa à Instituição - ROSÂNGELA VIEIRA DE ANDRADE - UCB