"Avaliação e otimização da produção de L-asparaginase por fungo endofítico isolado de Lactuca Sativa L."
"L-asparaginase, fungos endofíticos, Lactuca sativa L., otimização, leucemia linfoblástica aguda."
"A L-asparaginase (ASNase) é um dos pilares no tratamento da leucemia linfoblástica aguda (LLA); entretanto, suas versões bacterianas comerciais estão frequentemente associadas a elevada imunogenicidade. Este estudo teve como objetivo avaliar e otimizar a produção de L-asparaginase por fungos endofíticos isolados de Lactuca sativa L. Três isolados foram selecionados, sendo o isolado ARCU_F2 (identificado como Fusarium sp. ou Acremonium sp.) o que apresentou a maior atividade inicial (0,145 U/mL). A otimização por meio do delineamento de Plackett-Burman identificou a Lasparagina como o único fator positivo significativo para a atividade enzimática. Posteriormente, o Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) resultou em atividade máxima de 0,393 U/mL em pH 8, com 8% de asparagina e prolina; contudo, o modelo apresentou baixa capacidade preditiva devido à elevada variabilidade biológica. A extração foi otimizada por sonicação, demonstrando que amplitudes entre 40 e 50% foram eficazes na liberação de proteínas intracelulares. Ensaios utilizando meios quimicamente definidos resultaram na perda total da atividade enzimática, independentemente do crescimento da biomassa, sugerindo que a produção de ASNase por esse isolado é estritamente dependente de indutores orgânicos complexos ou está sujeita à repressão por via de nitrogênio. Esses resultados destacam o potencial de fungos endofíticos como fontes alternativas de ASNase, ao mesmo tempo em que evidenciam os desafios associados à padronização de bioprocessos envolvendo esses microrganismos."