TRANSFERÊNCIA DE GENOMA COMO ESTRATÉGIA NA CRIOPRESERVAÇÃO DE OVÓCITOS BOVINOS
Ovócito, Vitrificação, Placa metafásica, Corpúsculo polar.
A criopreservação de ovócitos é essencial para biotécnicas reprodutivas em produção animal, conservação de espécies e reprodução humana. No entanto, sua baixa eficiência em espécies domésticas, limita seu uso. Nesse contexto, uma alternativa promissora para superar essas limitações é a transferência do núcleo de um ovócito criopreservado para um citoplasma fresco e funcional, permitindo a reconstrução de um ovócito competente a partir de material previamente preservado. Dessa forma, este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência da técnica de transferência de genoma (TGN), utilizando a placa metafásica (PM) e o corpúsculo polar (CP) de ovócitos vitrificados, bem como investigar a capacidade dos ovócitos reconstruídos de serem fecundados, se desenvolverem até o estágio de blastocisto e estabelecerem gestação. Para isso, a TGN foi realizada a partir da transferência da PM e do CP de ovócitos bovinos maturados in vitro e vitrificados para o citoplasma de ovócitos receptores previamente maturados e enucleados. Inicialmente, foi realizada a padronização do procedimento de TGN para a utilização simultânea da PM e do CP de um mesmo ovócito vitrificado-aquecido, incluindo a determinação do tempo ideal de incubação pós-aquecimento para a reorganização da cromatina. As etapas futuras visam avaliar as características estruturais, morfológicas e funcionais dos ovócitos reconstruídos, incluindo a distribuição e a intensidade de sinal mitocondrial, a organização do retículo endoplasmático, a distribuição dos lisossomos e a integridade ultraestrutural, bem como as taxas de fecundação e de polispermia. Também será analisada a competência de desenvolvimento embrionário in vitro por meio da avaliação das taxas de formação de blastocistos e da cinética de desenvolvimento embrionário, associada à avaliação da qualidade molecular dos embriões, incluindo a expressão gênica e os padrões de metilação do DNA. Por fim, será investigada a capacidade desses embriões de estabelecer e manter a gestação após a transferência. Espera-se que a aplicação da TGN contribua para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões a partir de ovócitos criopreservados, representando uma estratégia inovadora para a preservação e utilização do material genético feminino em bovinos, com potenciais aplicações na produção animal e na conservação de recursos genéticos.