"Etiologia e desenvolvimento de um método eficiente para detecção dos fungos causadores de morte descendente no abacateiro."
Persea americana, Botryosphaeriaceae, Detecção, Diversidade.
A demanda de abacate tem aumentado devido a divulgação dos benefícios do fruto para a saúde e a sua utilização na culinária e/ou produção de cosméticos e fármacos. O abacate é a segunda frutífera mais produzida no Distrito Federal, sendo que a produção representa 62% do total de abacate comercializado na Central de Abastecimento do Distrito Federal (CEASA-DF). O abacateiro é uma frutífera perene bastante afetada pelos fungos causadores da morte descendente devido a colonização dos vasos do xilema e a morte dos tecidos vegetais. Os estudos taxonômicos sobre a etiologia da doença em outros países revelam vários fungos associados com a doença e a ocorrência de espécies de acordo com o local e região geográfica. Porém observa-se que as espécies da família Botryosphaeriaceae estão presentes em maior parte das observações desse quadro sintomatológico nas plantas, não somente no abacate, mas em outras frutíferas importantes. A identificação precisa dos agentes causais da morte descendente e cancro do abacateiro no Brasil ainda não foi realizada. Portanto, uma abordagem polifásica é essencial para o conhecimento das espécies fúngicas associadas com a doença. Para isso, coletas serão realizadas nas principais regiões produtoras de abacate e plantas sintomáticas serão selecionadas para isolamento fúngico. A identificação dos patógenos responsáveis pela doença serão determinadas utilizando características morfológicas, sequência de DNA e análises filogenéticas. O fator de elongação (TEF-1α) será utilizado como barcode para identificação prévia dos isolados. Posteriormente, isolados representativos de cada espécie serão utilizados para análise filogenética multilocus. Testes de patogenicidade serão realizados em planta e fruto utilizando a metodologia de disco de micélio e avaliação após 60 dias em planta e 7 dias em fruto. Para detecção, será desenvolvido primers para serem testados com protocolos baseados em loop-mediated isothermal amplification (LAMP) e qPCR multiplex buscando alta especificidade e sensibilidade para viabilizar a identificação rápida e precisa das espécies fúngicas nas áreas de produção. Além disso, testaremos os protocolos de detecção em cultura pura do fungo, folhas e caule de mudas sintomáticas. Portanto, esse projeto visa (i) identificar precisamente os fungos associados com a morte descendente e cancro do abacateiro, (ii) validar a técnica de LAMP para determinação das espécies fúngicas nas áreas de cultivo, e (ii) validar o método de qPCR multiplex para quantificação e detecção simultânea dos fungos associados com as plantas matrizes e mudas assintomáticas para implementação das estratégias de manejo e direcionamento dos programas de melhoramento do abacateiro.